免疫印迹
免疫印迹(immunoblotting)是一种将印迹技术与抗原-抗体反应特异性相结合的检测技术,用于定性定量检测生物大分子的存在、分子的大小及其与其他大分子的相互作用。包括DNA印迹、RNA印迹和蛋白印迹。
DNA印迹(Southern blotting)
主要用于检测基因组中某一特定DNA片段。利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜上,随后以放射标记的目的基因特异性DNA探针与滤膜孵育杂交,最后通过放射自显影法使目的DNA条带显示在胶片上。
DNA印迹(Southern Blotting)

RNA印迹(Nouthern blotting)
主要用于检测样本中特异性mRNA分子。mRNA首先被变性成为非折叠线性形式,而后根据片段大小由凝胶电泳予以分离,而后转移至硝酸纤维素膜上。滤膜随之与放射线标记的DNA/RNA杂交,通过放射只限于,显示特异性mRNA分子的存在。
RNA印迹(Nouthern blotting)

蛋白印迹(Western Blotting)
简称WB,用于分离和检测生物样本中某一特定蛋白。是指通过凝胶电泳胶分离不同分子量的混合蛋白质样本,然后将目标蛋白转移到载体(PVDF)膜上,而后根据抗原-抗体特异性结合的原理,将针对特定蛋白的特异性酶联抗体作用于滤膜,使目的蛋白与抗体特异性结合最后利用偶联的酶降解底物生成有色沉淀物或产生化学发光产物,从而在滤膜上显示蛋白的存在及量。WB蛋白质分析的一种常规技术,常用于鉴定某种特定蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析,还可以用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用等后续分析。
蛋白印迹(Western Blotting)
